Анализ крови на боррелиоз после укуса: когда сдавать?

Общие сведения

Прежде всего, что такое болезнь Лайма у человека? Болезнь Лайма представляет собой природно-очаговое бактериальное инфекционное заболевание с трансмиссивным путем передачи и полисистемным поражением опорно-двигательного аппарата, кожи, нервной системы и сердечно-сосудистой системы.

Широко распространенными синонимами заболевания в литературе являются клещевая эритема, иксодовый клещевой боррелиоз, лайм-боррелиоз, системный клещевой боррелиоз (Википедия). Как самостоятельная нозологическая форма заболевание определяется с 1984 г., после открытия связи нового вида боррелий с заболеванием. Код клещевого боррелиоза по МКБ-10: A69.2.

Случаи заболеваний Болезнью Лайма (БЛ) регистрируются на территории США, Европы и Азии. Природные очаги клещевого боррелиоза располагаются преимущественно в страхах с умеренным климатом в местах с лесным ландшафтом. Ареал распространения этого заболевания совпадает с ареалом обитания иксодовых клещей. Заболеваемость клещевым боррелиозом в РФ варьирует в пределах 5,5-11,5 %.

Природные очаги широко распространены в лесостепной/лесной зонах России на всем ее протяжении (от Балтийского побережья до Тихого океана). В природных очагах боррелии циркулируют между дикими животными и клещами. Среди инфекций, передаваемых при укусе клещей, болезнь Лайма является наиболее распространенной, на долю которой приходится около 64%.

Основная масса заболеваний приходится на весенне-летний период (с апреля по июнь включительно), однако, период заболеваемости зачастую смещается и зависит от погоды — чем раньше устанавливается теплая погода, тем быстрее пробуждаются/активизируются и нападают на человека клещи. На весенне-летний период приходится первый пик заболеваемости.

Второй пик приходится на период конец лета — начало осени (с августа по октябрь). БЛ болеют сельские и городские жители. При этом, в структуре заболеваемости доля горожан составляет почти 45%. Заражения людей происходит при посещении леса, во время отдыха в лесопарках внутри городской черты и даже на индивидуальных садово-огородных участках. Наибольшую активность иксодовые клещи проявляют в утренний/вечерний период, а наименьшую — в дождливую и жаркую погоду.

На территории России инфицированность клещей I. ricinus и Ixodes persulcatus боррелиями варьирует в широком диапазоне от 10 до 70%. При этом, около 15% клещей, кроме боррелий, инфицированы возбудителями эрлихиоза и/или клещевого энцефалита, что обуславливает высокий риск развития смешанной инфекции.

О своеобразии боррелиоза

Своеобразие клещевого боррелиоза или болезни Лайма состоит, прежде всего, в его клинической многоликости. В XX веке стали известны такие болезни, как кольцевидная эритема, лимфоцитарный менингорадикулоневрит, хронический клещевой артрит, атрофический акродерматит и еще около десятка подобных нозологий. Все они встречались в местностях, в которых обитают различные виды клещей – арагасовые, гаммазовые, но, прежде всего, иксодовые. Между этими проявлениями упорно искали взаимосвязь и наконец, в 1981 году, было совершено знаменательное открытие. Оказалось, что все эти различные состояния связаны с одним возбудителем — боррелией Бургдофера.

Достаточно крупная вспышка боррелиоза в городе Лайм, произошедшая в 1975 году, в результате которой у нескольких десятков человек развилось инфекционное поражение суставов, связанное с укусом клеща, внесла значительный вклад в описание нового вида и доказательства его причастности к заболеванию.

Этот микроорганизм полноценно был описан в 1984 году и выделен он из кишечника иксодовых клещей. После изучения оказалось, что возбудитель – боррелия, принадлежит к спиралевидным спирохетам и является «дальней родственницей» возбудителей сифилиса. Само собой разумеется, боррелиоз никакого отношения к сифилису не имеет и половым путём не переносится, просто возбудитель относится к тому же семейству микроорганизмов.

Симптомы клещевого боррелиоза

Уникальная особенность боррелиоза состоит в том, что это заболевание было открыто в конце XX века, что в клинике инфекций происходит совсем нечасто. Второй уникальной особенностью клещевого боррелиоза является так называемая мигрирующая эритема. Прежде, чем вести речь о том, какие анализы на боррелиоз сдаются и каковы бывают их результаты, необходимо вкратце рассказать об этом феномене, поскольку при его обнаружении практически стопроцентно можно определить, что у человека произошло заражение клещевым боррелиозом не проводя абсолютно никаких анализов.

Такие симптомы в медицине известны и они называются патогномоничными. Так говорят о признаке, который конкретно указывает на какое-либо одно, определенное заболевание, позволяя поставить диагноз «у постели больного» и не допуская при этом никаких иных толкований. Так, например, при появлении на слизистой оболочки рта пятен Бельского-Филатова-Коплика можно говорить о том, что пациент болен корью. При наличии же кольцевой мигрирующей эритемы можно сказать то же самое о клещевом боррелиозе со стопроцентной достоверностью. Разумеется, это этот факт дает врачу возможность сразу начать лечение, но брать различные анализы крови на боррелиоз тем не менее, необходимо, хотя бы для того, чтобы документально подтвердить диагноз, для оформления истории болезни. Что же такое мигрирующая эритема?

Этот симптом появляется в среднем через неделю на самом месте укуса клеща. Вначале образуется красное пятно и граница с не пораженной кожей является наиболее яркой. Размеры пятна могут быть от нескольких сантиметров и даже до 50 см, и при этом тяжесть течения заболевания никак не связана ни с размерами, ни с яркостью пятна. Пораженная кожа окрашена равномерно и чаще всего при наличии яркой кольцевидной эритемы у пациента возникают симптомы интоксикации. Возникает лихорадка, озноб, боли в мышцах, суставах слабость и утомляемость. Мигрирующая эритема получила свое название из-за того, что она постоянно увеличивается в размерах, хотя это этот симптом не является обязательным.

Кольцевидная эритема позволяет сразу поставить клинический диагноз клещевого боррелиоза. Но бывают такие ситуации, когда у пациента есть низкий иммунитет и такого симптома не появляется. Какие же существуют современные лабораторные способы диагностики боррелиоза? Если эритемы нет, поставить диагноз очень сложно, особенно если пациент не заметил укуса клеща.

В настоящее время для диагностики боррелиоза используются следующие методы:

• обнаружение антител методом ИФА, как иммуноглобулинов класса М, так и G;
• ПЦР — реакция с определением фрагментов наследственного материала боррелий;
• Иммуноблот, с помощью которого обнаруживают иммуноглобулины класса G.

И, разумеется, берется не только кровь на боррелиоз. При тяжелом течении заболевания, при дифференциальной диагностике боррелиоза и клещевого энцефалита иногда необходимо взятие на анализ спинномозговой жидкости, которое проводится во время люмбальной пункции. Обычно этот вид материала необходим при симптомах менингита или энцефалита.

Хроническое же течение клещевого боррелиоза поражает соединительную ткань, миокард и суставы, и протекает подобно ревматизму. Поэтому в поздних периодах заболевания, а также при хронических артритах, «подозрительных» на болезнь Лайма, практикуется взятие синовиальной жидкости, для которой необходимо пункция сустава. Но нельзя сбрасывать со счетов лабораторное исследование клеща для выявления наследственного материала Borrelia burgdorferi. Рассмотрим эти анализы на боррелиоз подробнее.

Анализы на боррелиоз

Тестирование на боррелиоз проводят несколькими способами. Выбор зависит от наличия средств на покупку реактивов, подготовленности персонала, оснащенности лаборатории. Самые точные анализы крови на боррелиоз основаны на определении генотипа вируса:

• хемилюминесцентный иммуноанализ;
• иммуночип;
• полимеразная цепная реакция.

Сущность анализа крови на боррелиоз

Анализы на энцефалит и боррелиоз специфичны, определяют возбудитель с высокой точностью. Биоматериалом является кровь или спинномозговая жидкость. Первая используется, если человек недавно был укушен клещом, инфекция не успела проникнуть в головной мозг. Ликвор исследуют, если у пациента присутствуют признаки болезни, но анализы отрицательны.

Когда и как выполняется процедура

Если пациент проконтактировал с зараженным человеком или же был укушен клещом, инкубационный период заболевания после инфицирования будет длиться до семи дней. Потом болезнь начинает активно развиваться — эта стадия может длиться от трех до тридцати трех суток.

Если в этот период обнаружены характерные кольцевидные пятна на кожных покровах пациента, есть другие симптомы заболевания, необходимо сдать анализы. Лучше всего производить забор крови спустя 2—4 недели после предполагаемого заражения. К этому моменту антитела уже будут вырабатываться организмом. Но болезнь еще не хронизируется, и ее можно будет успешно излечить.

Обычно направление на данный анализ крови дается в таких случаях:

1. При обнаружении на теле человека клещей или следов от их укусов.
2. Если первичный анализ был неточным, результат сомнительный или есть основания предполагать, что исследование крови провели и расшифровали некорректно.
3. Когда нужно провести дифференциальную диагностику и исключить другие заболевания неврологического характера.
4. Для того чтобы оценить, насколько эффективна проводимая терапия.

Выполняется анализ крови на боррелиоз так:

1. Вначале нужно взять сырье — кровь из вены пациента.
2. После этого кровь помещается в колбу — в некоторых лабораториях в сырье сразу же добавляют специальный гель.
3. Затем проводится серологическое исследование. Его цель — обнаружить антитела М и G, которые начинают продуцироваться в ответ на распространение микроорганизмов. Для этого применяется метод ИФА.

В 50% случаев результаты анализов на боррелиоз не показывают присутствия антител в крови пациента. Но это не означает, что человек точно не инфицирован. Поэтому спустя еще 3—4 недели анализ делают повторно.

Специальная подготовка к забору крови для этого исследования не нужно. Результаты можно получить уже через 1—2 дня, в большинстве районных поликлиник анализ делается бесплатно. В частных клиниках услуга оплачивается согласно тарифам медицинского учреждения.

Когда нужно сдавать анализ на боррелиоз?

Каждый вирус и бактерия имеют набор ДНК, который выявляет иммуноанализ или ПЦР. Боррелиоз развивается не сразу, вирус циркулирует в крови несколько дней, прежде чем размножиться и попасть в ЦНС. Поэтому тест выполняют во временные промежутки, предписанные врачом.

Через 2-4 недели после укуса клеща сдают ИФА или ПЦР. Если исследование провести заранее, возможен ложноотрицательный результат. Для подтверждения диагноза сдают повторный тест.

Болезнь Лайма имеет несколько вариантов симптоматики в зависимости от стадии инфекции.

1. Образование круговой эритемы вокруг места укуса. Она расширяется. Кожа становится красной, чешется, шелушится. Образуются участки омертвевшей ткани. Появляются вторичные эритемы.
2. Отсутствие эритемы. Присутствуют признаки энцефалита. К ним относится лихорадка, интоксикация, симптомы невралгии.

В разгар болезни появляются признаки поражения ЦНС:

• смена настроения от возбудимости до подавленности;
• отсутствие чувствительности в верхних и нижних конечностях;
• обильная рвота;
• чувствительность к свету;
• припадки по типу эпилепсии;
• характерная поза для энцефалита (лёжа на боку с запрокинутой головой).

Подготовка к сдаче анализов

Тестирование является специфичным, определяется точные генотипы возбудителя, поэтому подготовки пациента не требуется. Его сдают в любое время суток. Исследование проводят до начала антибактериальной терапии или во время нее для проверки результата.

Если клещ доставлен в лабораторию с пациентом, его отправляют на проверку. Не рекомендуется самостоятельно отделять паразита, следует обратиться в травмпункт. Клеща помещают в пробирку, отправляют в лабораторию. Чем скорее проведут исследование, тем информативнее результат.

Диагностика боррелиоза

Разнообразные клинические проявления боррелиоза создают трудность для диагностики, так как не позволяют поставить однозначный диагноз. Тщательно собранное интервью от пациента позволяет оценить риск возможного заражения, клиническая картина и диагностические исследования помогут установить правильный диагноз.

Среди основных лабораторных методов можно выделить прямые исследования, то есть микроскопическая оценка патогенного микроорганизма, посев и изоляция, определение специфических для данного штамма бактериальных антигенов и поиск бактериальной ДНК методом цепной реакции полимеразы (англ. polymerase chain reaction, PCR).

В клинической практике важное значение имеет правильный подбор методов диагностики, проведение исследования и правильная интерпретация полученных результатов.

До сих пор не был разработан еще ни один тест, который на 100% мог бы подтвердить или исключить боррелиоз, а все имеющиеся в настоящее время на рынке имеют только указательный и вторичный характер.

Микробиологическое исследование

Основная суть микробиологического исследования заключается в изоляции возбудителя и его оценка под микроскопом. В случае боррелиоза этот метод применяется сравнительно редко, так как не является эффективным.

Чтобы диагностировать болезнь Лайма необходимо продержать возбудителя три месяца на подходящей культуральной среде, а отрицательный результат не исключает инфекции.

Borrelia burgdoreri можно выделить из кожных изменений, спинномозговой жидкости, синовиальной жидкости и крови, причем в основном положительные результаты получают с кожных изменений. Чувствительность теста (способность распознать возбудителя) колеблется в пределах 10-30%.

Исследование антигенов

Borrelia burgdorferi – это организм, имеющий особые наборы белков, так называемые липопротеины (Ospa, OspB, OspC и другие), которые могут быть использованы в качестве диагностических антигенов.

Эти антигены обладают высокой иммунногенностью, это значит, что после попадания в организм они отвечают за активацию иммунной системы и вызывают против себя определенный тип иммунного ответа, связанный с производством антител.

Различия в строении и составе отдельных белков позволяют выделить несколько серотипов, то есть видов микроорганизмов. В США болезнь Лайма вызывается только один штамм, а именно: Borrelia burgdorferi.

В Европе, кроме основного вида, описаны еще три других патогенных для человека: Borrelia garinii, Borrelia afzelii, Borrelia spielmani, что затрудняет микробиологическую диагностику.

Серологические исследования

Наиболее удобный вариант при регулярно проводимой диагностике являются серологические исследования. Сегодня на рынке есть много серологических тестов, но существует также и множество проблем, связанных с их использованием, начиная от времени, необходимого для получения соответствующего уровня антител и заканчивая их чувствительностью и специфичностью.

На первом этапе болезни, который продолжается около трех недель, не обнаруживается специфических антител, что может создавать определенные трудности для диагностики. Антитела создаются с целью устранения патогена.

Как и при большинстве инфекций первыми появляются антитела класса IgM. Они обнаруживаются в сыворотке крови приблизительно через 3-4 недели после заражения. Высокий уровень этих антител отмечается через 6-8 недель, а затем происходит постепенное снижение.

Иногда, даже несмотря на эффективную терапию, уровень антител IgM сохраняется в сыворотке крови в течение очень долгого времени (месяцы и даже годы). Через некоторое время после начала болезни появляются антитела класса IgG, которые являются ключевыми в борьбе с патогенами.

Как и в случае антител IgM уровень антител IgG может сохраняться годами, что не позволяет использовать их для контроля процесса лечения боррелиоза. Имейте в виду, что на выработку антител, а следовательно, и на результат исследования может повлиять ранняя терапия антибиотиками.

Когда-то к использованию рекомендовались тесты ELISA, которые в нынешнюю эпоху потерял свое значение, потому что иногда мы наблюдаем неспецифические перекрестные реакции и ложноположительные результаты.

Метод Вестерн-Блота основан на обнаружении антител против бактерий. Заключается в отделении белков (бактериальных антигенов), содержащихся в крови и их идентификации. Однако и в этом случае отрицательный результат теста не может исключить инфекции Borrelia burgdorferi (еще не успели возникнуть антитела, терапия антибиотиками).

Если клиническая картина указывает на боррелиоз, а серологические тесты дают отрицательный результат, необходимо повторить исследование через 3-4 недели для окончательного подтверждения.

В случае подозрения на нейроборрелиоза обнаружение антител в спинномозговой жидкости является достаточным доказательством, подтверждающим диагноз.

Метод PCR в диагностике боррелиоза

Несмотря на значительное развитие серологических методов, по-прежнему трудно дать однозначный ответ о наличии заболевания. В диагностически сложных случаях полезным может оказаться техника цепной реакции полимеразы, так называемый, метод PCR.

Он позволяет многократное тиражировать характерные для данного возбудителя фрагменты ДНК, что позволяет обнаружить даже отдельные, мелкие части в тканях и жидкостях организма. В настоящее время это исследование не является широко применяемым из-за довольно частого ложного срабатывания.

Тесты на боррелиоз не всегда дают 100% уверенности, что пациент подхватил болезнь Лайма. Поэтому полезно проводить также исследования спинномозговой жидкости и исследование потоков мозга (SPECT), в основном, для исключения других заболеваний. В случае диагностики этого заболевания, необходимо применить соответствующее лечение боррелиоза.

Основные способы лабораторной диагностики

Возбудителями заболевания выступают боррелии – патогенные организмы из рода спирохет. Инкубационный период длится от 2 дней до месяца (в среднем 3-11 дней), после чего у больных наблюдаются симптомы, напоминающие грипп или ОРВИ, в сочетании с кожными проявлениями – кольцевидной эритремой.

Болезнь Лайма можно определить сразу после попадания возбудителей в организм, если из тела пострадавшего удалось извлечь неповрежденного клеща и доставить насекомое в лабораторию для обследования методом ПЦР (полимеразная цепная реакция). Если в ДНК паразита обнаруживаются боррелии, больному проводится профилактическое лечение антибактериальными препаратами.

При появлении симптомов болезни Лайма на любой стадии для уточнения диагноза назначается ряд исследований:

• ИФА (иммуноферментный анализ);
• хемилюминисцентный иммуноанализ;
• иммуночип;
• вестерн-блот (иммуноблот);
• ПЦР спинномозговой или суставной жидкости.

Если болезнь перешла на вторую или третью стадию, больным дополнительно назначается общий анализ крови для выявления воспалительных процессов в организме и инструментальные методы исследования (УЗИ, рентген, КТ и МРТ), которые позволяют оценить состояние внутренних органов и выявить возможные поражения.

СПРАВКА! Специфическим признаком клещевого боррелиоза является кольцевидная эритрема – пятно, которое по внешнему виду напоминает мишень. При его наличии диагноз может быть поставлен без дополнительных анализов, но дерматологические признаки характерны далеко не для всех случаев заражения, поэтому диагноз необходимо уточнить с помощью лабораторных методов исследования.

Расшифровка анализов на боррелиоз

Когда сдается анализ крови на болезнь Лайма, то исследуются антитела классов IgM и IgG, полученные показатели вносятся в бланк результатов. Получить результаты можно с помощью методики иммуночипа и иммуноблота.

Далее можете ознакомиться с расшифровкой полученных результатов:

1. В случае, когда количество антител в плазме крови находится на уровне менее 0,8 Ед/мл, либо же они полностью отсутствуют – это показатель того, что пациент не был заражен боррелиозом.
2. Когда показатель антител находится на уровне от 0,8 до 1,1 Ед/мл, то такой анализ относится к категории сомнительных. Однозначного решения вынести нельзя, поэтому обычно назначается повторный анализ для подтверждения диагноза либо же его опровержения.
3. Если антитела к боррелиям находятся на уровне от 1,1 Ед/мл и выше, то диагноз подтверждается и назначается курс лечения.

В том случае, когда после сдачи анализа в крови были найдены только антитела IgG – это показатель того, что человек уже был заражен боррелиозом ранее. Либо же он был вакцинирован против заболевания данного типа. Иммуноглобулины данного типа способны сохранятся в крови человека на протяжении длительного времени, даже после того как наступило полное излечение.

Что происходит с организмом после инфицирования?

Заболевание можно определить уже через 6-12 суток. Благодаря клиническим исследованиям, удалось научиться определять ранние и поздние периоды развития боррелиоза.

1. На первом этапе распространения наблюдаются кожные и общеинфекционные симптомы.
2. Вторая стадия наступает на 2-4 неделю с момента, когда инфицированный клещ укусил человека. В этот период наблюдается распространение вируса по всему организму.
3. Третья стадия может наступить как через несколько месяцев после заражения, так и спустя годы. Чаще всего это уже хроническое заболевание.

Главными симптомами на начальном этапе являются: повышение температуры, человека мучают постоянные боли в суставах и мышцах, сонливость, апатия, на месте укуса появляется красное пятно, размеры которого могут достигать 10 см.

При положительном результате анализа

Если анализ на боррелиоз оказался положительным, врач-инфекционист назначит лечение, причем его схема будет построена в зависимости от стадии заболевания. Больного изолируют и помещают в инфекционную больницу для прохождения курса лечения.

На ранних стадиях лечение будет эффективным, никаких последствий для организма не возникнет. На поздних стадиях, при поражении нервной системы, лечение не дает стопроцентного эффекта, в результате чего может наступить инвалидность.

При отрицательном результате анализа

Получение отрицательного анализа является поводом для снятия диагноза. Однако в случае, когда симптомы сохранились, стоит провести повторное исследование через несколько дней для того чтобы убедиться в отсутствии возбудителя в крови.

Последствия клещевого боррелиоза и осложнения

Последствия боррелиоза определяются своевременностью диагностики, и превентивной антибиотикотерапии. Ранняя диагностика (обнаружен боррелиозный клещ, положительная лабораторная диагностика) позволяют провести своевременное лечение и предупредить переход заболевания в диссеминированную/хроническую стадию. В случаях запоздалой диагностике и лечения существует высокий риск развития поражений сердечно-сосудистой системы, ЦНС, суставов, которые могут привести к инвалидности.

Профилактика боррелиоза

Специфическая профилактика до настоящего времени в РФ отсутствует. Основную роль играют неспецифические меры профилактики, направленные на предупреждение присасывания клещей, раннее их обнаружение и удаление, а также превентивная антибиотикотерапия при укусе клеща.

При нахождении в лесу важно защититься от нападения клещей. Для этого необходимо соблюдать следующие рекомендации:

• Надевайте по возможности светлую одежду, на которой хорошо видны клещи с длинными рукавами и прилегающими манжетами. Рубашка должна быть заправлена в штаны, а они — в носки/сапоги. Обязателен головной убор. Одежду рекомендуется обработать репеллентами против клещей.
• В лесу держитесь середины тропинки, обходите места с высокой травой. Периодически осматривайте друг друга/себя со всех сторон. Делайте привалы на сухих и солнечных участках.
• Если вы обнаружили на коже уже присосавшегося клеща, его необходимо как можно быстрее удалить.
• Как правильно выполнить эту процедуру показано на рисунке ниже.

Извлеченный клещ необходимо доставить в лабораторию для проведения экспресс-теста на боррелии.

Химиопрофилактика (антибиотикопрофилактика)

Основным показанием к ее проведению является факт выявление боррелий в присосавшемся клеще или даже факт присасывания иксодового клеща. Основные антибиотики для профилактики боррелиоза после укуса клеща: Доксициклин , Амоксициллин ( Амоксициллин в комплексе с Клавулановой кислотой ), Бензатина бензилпенициллин. Доказано, что своевременное назначение антибиотиков в первые 3 суток от момента обнаружения клеща, статистически достоверно уменьшает риск развития болезни Лайма. В случаях, когда химиопрофилактика болезни Лайма не была проведена в ближайшие 3 суток от момента присасывания клеща, необходимо наблюдение за пострадавшим лицом в течение 1 месяца и при появлении первых клинических симптомов (мигрирующей эритемы) своевременно обращаться к врачу для проведения адекватной этиотропной терапии.

Специфическая профилактика (прививка от боррелиоза) в РФ не разработана. Однако, недавно появилась информация о том, что французской компанией Valneva разработана вакцина против болезни Лайма, которая имеет высокую эффективность и уже успешно прошла клинические испытания. Препарат через несколько лет появиться в продаже, что позволит, сделав прививку, не бояться заразиться возбудителем болезни Лайма.

Прогноз

Прогноз заболевания достоверно коррелирует с адекватностью антибактериальной терапии и с ранними сроками ее начала. При своевременном и адекватном лечении прогноз благоприятный с полным выздоровлением. При хронизации инфекционного процесса — процесс неблагоприятный вплоть до инвалидизации.